液相色谱仪器常见的问题及解决方法分享

2021-10-23 08:22:39

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液相色谱仪器是在经典色谱法的基础上引用了气相色谱的理论。在技术上，流动相改为高压输送；色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱（每米塔板数可达几万或几十万）；同时，柱后连有高灵敏度的检测器可对流出物进行连续检测。

只要求试样能制成溶液，而不需要气化，因此，不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大（大于400以上）的有机物（些物质几乎占有机物总数的75%-80%）原则上都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。据统计，在已知化合物中能用气相色谱分析的约占20%，而能用液相色谱分析的约占70-80%。

液相色谱仪的常见问题及解决方法介绍：

(一)保留时间变化

1.柱温变化：柱恒温，必要时需配置恒温箱

2.等度与梯度间未能充分平衡：至少用10倍柱体积的流动相平衡柱

3.缓冲液容量不够：用》25mmol/L的缓冲液

4.柱污染：每天冲洗柱

5.柱内条件变化：稳定进样条件,调节流动相

6.柱快达到寿命：采用保护柱

(二)保留时间缩短

1.流速增加：检查泵,重新设定流速

2.样品超载：降低样品量

3.键合相流失：流动相pH值保持在3~7.5检查柱的方向

4.流动相组成变化：防止流动相蒸发或沉淀

5.温度增加：柱恒温

(三)鬼峰

1.进样阀残余峰：每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗

2.样品中未知物：处理样品

3.柱未平衡：重新平衡柱,用流动相作样品溶剂 (尤其是离子对色谱)

4.三弗乙酸(TFA)氧化(肽谱) ：每天新配,用抗氧化剂

5.水污染(反相) ：通过变化平衡时间检查水质量，用HPLC级的水

(四) 基线噪声

1.气泡(尖锐峰) 流动相脱气：加柱后背压

2.污染(随机噪声) ：清洗柱,净化样品,用HPLC级试剂

3.检测器灯连续噪声：更换氘灯

4.电干扰(偶然噪声) ：采用稳压电源,检查干扰的来源(如水浴等)

5.检测器中有气泡：流动相脱气,加柱后背压

好了，以上便是关于液相色谱仪的相关内容介绍了。

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