HPLC缓冲液选择考量因素
化学纯度:HPLC实验所用流动相添加剂(缓冲液、盐、酸和碱)及有机溶剂质量必须适合检测器灵敏度和洗脱方案。为实现较好的色谱分离效果,建议使用高质量溶剂和试剂。
化学相容性:必须根据色谱柱外壳材料和固定相性质选择缓冲液组成及流动相pH值,避免损坏色谱柱硬件和柱床。
缓冲液溶解性:缓冲液需要完全溶于水且不会沉淀。将缓冲液与有机溶剂混合时,必须谨慎选择缓冲液浓度,避免因浓度过高而形成沉淀。否则可能造成泵运行问题,引起HPLC色谱柱堵塞。
缓冲强度:与固定相相互作用弱的洗脱液今可从色谱柱上洗脱弱吸附分析物,而强相互作用洗脱液则可洗脱强吸附样品分子。不同溶剂的洗脱或溶剂强度主要取决于所用固定相的类型。除洗脱强度之外,缓冲液粘度和紫外线吸收率也对HPLC分析适用性存在重要影响。
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