做好液相色谱仪器的日常维护工作,可以有效降低仪器故障的频率,延长仪器和色谱柱的使用寿命。液相色谱的日常维护需要注意以下五个方面:
一、工作环境要求
温度:10 ~ 30℃;相对湿度< 80%;最好保持恒温恒湿,远离高压干扰和高震动设备。
二、高压泵保养
1、要选用优质的溶剂和试剂,尽量用色谱级溶剂作为流动相,进入仪器前用0.45um滤膜过滤,并进行脱气处理。
2、当高压泵开始使用时,一定要先将液相色谱排气几分钟,防止产生气泡;使用后,用流动相清洗泵和柱约30min。如果使用缓冲液,一定要用合适的流动相彻底清洁。
3、定期检查更换在线过滤器及相关垫片,并经常将微孔过滤头清洗到深夜。
三、手动取样器的维护
1. 手动取样器的维护
①样品溶液在注射前必须用0.45um滤膜过滤,以减少颗粒对注射阀的磨损。
(2)旋转阀芯时不能太慢,但不能停留在中间位置,否则流动相被堵塞,使液相色谱仪泵内压力急剧增加,甚至超过溶解样泵的溶剂清洗,再用清水冲洗。
2. 进样口的清洁
每次分析后,进料口应反复冲洗,以防止样品交叉污染。
四、色谱柱维护
1. 柱在任何情况下不得发生碰撞、弯曲或强烈振动,以免损坏柱床,导致柱效率下降。
2. 当色谱柱与色谱仪连接时,必须清洗阀门或管路,防止杂质或颗粒进入色谱柱。
3.流动相应严格脱气,避免高粘度的溶剂作为流动相,防止阻力过大,降低塔效率。
4. 严格控制进样量,避免超过塔负荷。
5. 每天分析测定结束后,用适当的溶剂对色谱柱进行清洗,并定期用适当的溶剂(使用手册推荐的溶剂)对色谱柱进行清洗或再生。
6. 如果柱长时间不使用,液相色谱仪器厂家应在彻底清洗后,用使用说明书中规定的溶剂保存柱。然后将色谱柱从液相色谱仪中取出,用塞子密封保存,并定期用适当的流动相清洗,以避免干燥。
7. 为了延长柱的使用寿命,请使用保护柱。
五、检测器的维护
1. 光源维护
为了延长液相色谱仪紫外灯的使用寿命,在分析前和柱平衡接近完成时应打开检测器;分析完成后立即关闭检测器。同时,不要频繁切换UV灯,否则会缩短UV灯的寿命。通常间隔时间在3小时以上。
对于二极管阵列探测器,应注意检查光源的使用时间。一般氘灯的推荐使用时间为2000h,钨丝灯的至大使用时间为2000h。当氘灯达到额定寿命时,若仍能满足灵敏度要求,可继续使用;但是,当钨丝灯达到其额定寿命时,必须更换。
2、流道清洗
应定期清洗色谱仪器探测器的流道,防止污染物吸附引起的基线噪声增加。